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原代細(xì)胞制備與培養(yǎng)

來源:萬物   發(fā)布時間:2021-08-31

原代細(xì)胞制備與培養(yǎng)

將動物各種組織從機(jī)體中取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA) 或機(jī)械方法處理,分散成單細(xì)胞,在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長和繁殖,萬物生物提原代培養(yǎng)服務(wù)供給您高質(zhì)量的原代細(xì)胞株。原代培養(yǎng)的基本過程包括取材、培養(yǎng)材料的制備、接種及培養(yǎng)等步驟。原代培養(yǎng)的方法很多,基本和最常用的是組織塊培養(yǎng)法和分離細(xì)胞法。 

基本操作過程 

 1)、用培養(yǎng)液濕潤所取組織材料,并用鋒利的眼科剪將附在其上的脂肪和結(jié)締組織去除干凈。再用平衡液(PBS)或Hanks液漂洗;用鋒利的眼科彎剪將組織塊剪成小塊;再用PBS或Hanks液漂洗多次,直至液體不渾濁、無油滴、清亮為止。  

2)、用濕潤的吸管吸取切碎的組織塊,清清吹到培養(yǎng)瓶皿中,并將其按一定間距均勻放在培養(yǎng)瓶底壁上,量不要過多,要將組織塊切面貼在培養(yǎng)瓶底壁上;  

3)、將培養(yǎng)瓶翻轉(zhuǎn),使瓶底朝上,在種植了組織塊一側(cè)的對側(cè)面加足培養(yǎng)液,勿使組織塊與培養(yǎng)液接觸,塞緊瓶塞; 

4)、將種植了組織塊的一側(cè)朝上,靜置于37℃培養(yǎng)箱中;待組織塊貼壁1h到3h后翻瓶,使貼壁的組織塊浸沒與培養(yǎng)液中,靜置;  5)、每隔2到3天更換一次培養(yǎng)液,或者根據(jù)培養(yǎng)瓶種顏色的變化確定換液時間。

服務(wù)特點
1、原代細(xì)胞分離培養(yǎng)與鑒定(鑒定可提供流式細(xì)胞儀檢測、免疫細(xì)胞化學(xué)、RT-PCR 、蛋白免疫印跡等多種方法檢測)。
2、細(xì)胞傳代代數(shù)低(一般4代),細(xì)胞狀態(tài)好,無污染。
3、根據(jù)您的需要可以提供多種原代培養(yǎng)的細(xì)胞。
需提供的資料
1、詳細(xì)說明進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)的組織,并確定組織是由客戶提供還是本公司提供。
2、盡可能提供該原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件,或者由本公司摸索培養(yǎng)條件。
3、對于一些常見的原代培養(yǎng)組織,因為保存運輸?shù)牟槐憧赡軙档驮囵B(yǎng)的成功率,建議客戶選擇由本公司提供相應(yīng)的組織。
提交的結(jié)果

提供凍存或處于對數(shù)生長期的細(xì)胞株一瓶(細(xì)胞培養(yǎng)條件,圖片)。



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